美国临床实验室标准协会CLSI C62-A临床质谱新标准

　　美国临床实验室标准协会CLSI近来发布了质谱分析方法开发和验证的标准规程CLSI C62-A指导文件。质谱法最初应用于临床仅是由经过良好培训和有经验的操作者做专门测试之用。如今，质谱已经成为代谢疾病诊断、疾病筛查、激素含量测定、药物治疗监测、微生物鉴定、药物毒性和中毒识别等必不可少的工具。如果没有目前的临床质谱定量方法，新生儿无法检测代谢疾病，妇女和儿童睾酮的测定准确度等同于猜测，且大量的化疗方法和免疫抑制剂监测也会受到限制。

　　迄今为止，很少能看到有关质谱在临床诊断中应用的指导规范。美国临床实验室标准协会CLSI近来发布了质谱分析方法开发和验证的标准规程CLSI C62-A指导文件。该文件旨在规范LCMS法，促进其在临床实验室中的应用演化。

　　高选择性和特异性的选择离子监测模式和精确的确证及定量能力是LCMS在临床实验室得以应用的驱动力。LCMS分析特异性优于目前普遍采用的免疫测定法和酶化验法。免疫法并不能适用于所有分析物，开发过程耗时长，需要对抗体进行评价。正如免疫测定法从50年前开始进化至今天得以成为诊断测试领域占据领导地位的自动化技术一样，质谱法也会继续促进和影响临床实验室的发展。因此，LCMS应用的标准化是必要的。

　　质谱法最初应用于临床仅是由经过良好培训和有经验的操作者做专门测试之用。如今，质谱已经成为代谢疾病诊断、疾病筛查、激素含量测定、药物治疗监测、微生物鉴定、药物毒性和中毒识别等必不可少的工具。如果没有目前的临床质谱定量方法，新生儿无法检测代谢疾病，妇女和儿童睾酮的测定准确度等同于猜测，且大量的化疗方法和免疫抑制剂监测也会受到限制。尽管得到广泛应用，但目前仅有一个定量检测方法获得FDA批准。所有其他检测方法均被FDA纳入实验室自建检测方法(laboratory-developed test，LDT)类别中。LDT的定义是设计、操作、验证以及使用在单独实验室的体外诊断测试。因此，没有任何分析同一物质的两个LCMS方法是相同的。测定同一目标的两个LCMS方法之间存在的差异性很难一一列举，其中就包括样品处理方法、使用的仪器、液相色谱固定相和流动相、质谱离子源、化合物特定参数、离子监测以及最重要的校准品使用。

　　不幸的是质谱法极少有高标准的标准测定程序和证书参照物可供使用。仅仅最近LCMS分析目标物才开始逐渐增加基于准确度的性能验证，然而这些仅仅适用于维生素D、雌二醇和睾酮。

　　CLSI C50提供了关于质谱的总体认识和在临床实验室应用的原则，但没有提供方法开发和验证的系统路径。在CLSI C62-A指南发布之前，临床实验室开发本实验室的质谱方法并进行验证时常依照其它工业标准，例如FDA的“Guidance for Industry: Bioanalytical Method Validation”以及欧盟药品管理局EMA的“Guideline on Bioanalytical Method Validation”或者“Scientific Working Group for ForensicToxicology Standard Practices for Method Validation”。虽然这些指南对于质谱临床实验室有着极为重要的价值，而且确实为CLSI C62-A的制定提供了帮助，但它们不能表现临床检测的特殊需求，例如medical decision points，生物变异，总容许误差，质量控制监测。

　　随着质谱技术临床实验室应用的增长以及使用该技术的人群更加广泛，稳定和规范LCMS的需求也在增加。CLSI C62-A列出了临床实验室质谱执行规范的重要内容。表1中三个指南有很多相似处，但新的指南能提供更加全面的评价方法。临床上每一个分析项目开展都需要有相应的验证条款，CLSI C62-A指南希望为所有分析项目提供一个共同的验证路径框架，以确保所有的LCMS方法经过合理的验证并符合标准接受准则。

　　CLSI C62-A认为规范化的第一步是建立计量学溯源性至稳定的参照物。

　　FDA正在着手开展并最终执行LDTs风险系统评价。在FDA重申其对LDTs的控制权力之际，CLSI C62-A指南的出台非常及时。FDA提议的规程可能会导致对FDA认可的质谱方法需求的增加。

　　表1. CLSIC62-A同FDA美国食品和药品管理局、EMA欧洲药品管理局生物分析方法学验证指南对比